光是调控植物生长发育的重要环境信号。植物种子在土壤中发芽后,通过暗形态建成促进幼苗快速伸长,出土见光;然后通过光受体介导的光信号转导促进光形态建成,来抑制下胚轴伸长、促进子叶和叶片的扩展以及叶绿素的合成,使幼苗得以进行光合作用,从而实现自养生长。bHLH类转录因子PIFs(包括PIF1、PIF3、PIF4和PIF5)是红光/远红光受体光敏色素(phytochromes)的关键下游因子,通过促进下胚轴的伸长来抑制光形态建成过程。红光下激活的光敏色素B (phyB)通过与PIFs互作,诱导其磷酸化和蛋白降解,从而促进光形态建成。H2A.Z作为一种组蛋白变体,在植物温度感知、发育和开花时间调控等过程中发挥重要作用;SWR1复合体则负责催化H2A.Z在染色质中的占位。目前为止,已知PIF4和SWR1复合体在调控温度依赖的植物生长过程中具有十分紧密的关系,但是二者发挥作用的生化分子机制尚不明确。
2023年4月28日,Journal of Genetics and Genomics在线发表生命科学学院杨洪全教授和茅志磊副研究员团队题为“PIFs interact with SWC6 to regulate H2A.Z deposition andphotomorphogenesis in Arabidopsis”的研究论文。该研究发现拟南芥光敏色素互作因子PIFs通过与SWR1复合体亚基SWC6直接互作,抑制SWC6与光形态建成关键正调控因子HY5的结合,减少H2A.Z在生长素响应基因上的占位,从而抑制光形态建成。
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该研究首先发现在酵母细胞和体外系统中PIF1、PIF3、PIF4和PIF5分别与SWC6存在互作;在烟草细胞共表达PIF1、PIF3、PIF4和PIF5分别与SWC6的两两组合,在细胞核中可定位到相同的核斑点;免疫共沉淀实验显示PIF3和PIF4与SWC6在拟南芥体内存在互作。通过把swc6和arp6分别与pifq四突变体杂交,得到swc6 pifq和arp6 pifq五突变体,比较红光下下胚轴长度,发现SWC6和ARP6在红光下主要通过依赖于PIFs来控制下胚轴的伸长。基因表达结果显示PIFs与SWC6和ARP6拮抗地调控生长素响应基因IAA6、IAA19、 IAA20以及IAA29的表达;ChIP-qPCR结果显示pifq突变体中在IAA6和IAA19基因上的H2A.Z占位水平比WT明显上升。通过蛋白体外和体内实验,发现PIFs可能通过与HY5竞争结合SWC6来抑制SWR1复合体在这些基因上的催化活性,从而调控H2A.Z的占位和光形态建成。
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PIFs参与H2A.Z在生长素响应基因IAA6, IAA19占位的调控机制
A:在黑暗生长的野生型幼苗中,PIFs大量积累,而HY5通过泛素化26S蛋白酶体途径发生降解。因此,PIFs与SWC6互作,充分抑制SWR1复合体的活性和H2A.Z的占位,进而充分激活 IAA6和IAA19的表达,促进下胚轴伸长。
B:在红光下生长的野生型幼苗中,HY5蛋白大量积累,而PIFs因先后发生磷酸化泛素化和蛋白降解导致其蛋白水平较低。因此,HY5与SWC6和ARP6的互作只能在一定程度上被低水平的PIFs所抑制,使SWR1复合体以合适的活性来促进H2A.Z在IAA6和 IAA19基因上占位,从而维持这些基因表达处于合适的水平以及适度的下胚轴伸长。
C:在红光下生长的pifq突变体幼苗中,由于没有PIFs蛋白,HY5与SWC6和ARP6的互作不受PIFs的抑制,使SWR1复合体能充分促进H2A.Z在IAA6和 IAA19基因上的占位,从而抑制这些基因的表达和下胚轴的伸长。
综上,该研究发现PIFs通过与SWC6的互作,抑制H2A.Z在生长素响应基因上的占位来促进这些基因的表达,进而调控光形态建成的分子机制。
生命科学学院博士生陈慧茹为该论文第一作者,茅志磊副研究员为通讯作者。该研究得到国家自然科学基金、国家重点研发计划等项目的资助。
论文链接:https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1673852723000954?via%3Dihub
供稿:杨洪全
责任编辑:陈婉娴